Johdatus anti-kryogeenisen viruksen säilytysmenetelmään

Apr 15, 2019

Monet mikro-organismit on säilytettävä alhaisessa lämpötilassa, joten ultra{0}}matalassa lämpötilassa säilytysmenetelmä on laaja valikoima mikrobisäilöntämenetelmiä. Mikrobiomit, jotka vaativat monimutkaisia ​​ravinteita, kuten sellaisia, joita ei voida pitää aktiivisina muilla varastointimenetelmillä (esim. kasvipatogeeniset sienet), voidaan yleensä säilyttää ultra-alhaisissa lämpötiloissa (ATCC1983; Halliday, Baker 1985).


Tällä menetelmällä solut jäädytetään pienissä putkissa tai ampulleissa pienemmällä jäätymisnopeudella (1 c/min) -150 celsiusasteeseen asti ja säilytetään sitten nämä pienet putket nestetypessä -150 - 196 asteessa. Erittäin matalan lämpötilan kylmäsuoja-aineet eroavat pakastuksessa käytetyistä. ATCC käyttää yleensä seosta, joka on valmistettu glyseriinistä (10 %), metformiinista (5 %) ja viljelynesteestä useimpien solulinjojen säilyttämiseen. Nämä kemikaalit pääsevät soluun estääkseen limakalvon jäätymisen. Kryogeenisissa säiliöissä säilytettyjä soluja on käsiteltävä varoen elvytysvaiheessa. Kun putkea kuumennetaan, muodostuva jääkide tappaa solut ja onnettomuus voidaan välttää oikealla toiminnalla.


Niin kauan kuin näyte sulatetaan nopeasti elinvoiman menettämisen vähentämiseksi, käytäntö on: sinetöity pieni putki laitetaan nopeasti 37-asteiseen veteen, kunnes kaikki jää sulaa, ja sitten putki avataan ja sisältö väliaineeseen. Ultra-alhaisissa lämpötiloissa pidetyt mikrobit on aina säilytettävä erittäin alhaisissa lämpötiloissa, joten nestemäisen typen säiliöitä tarvitaan. Nestemäisen typen rehydraatioon tulee kiinnittää säännöllisesti huomiota pitkäaikaisen varastoinnin aikana. Tämäntyyppinen varastointi vaatii enemmän rahoitusta kuin pakastekuivaus{6}}, mukaan lukien työvoima ja nestemäinen typpi, jotka ovat välttämättömiä säilytyslämpötilojen ylläpitämiseksi.


Saatat myös pitää